細(xì)胞治療項目離不開支原體檢測。qPCR支原體檢測法（NAT法），相較于藥典中傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和指示細(xì)胞法，NAT法方便快捷、準(zhǔn)確性高、特異性強。 

使用嵌合抗原受體(CAR) T細(xì)胞的過繼細(xì)胞療法(ACT)已經(jīng)改變了復(fù)發(fā)/難治性CD19+ B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病和淋巴瘤的治療。在實體瘤的情況下，盡管在解決腫瘤浸潤有限、CAR - T功能差和持久性等問題方面取得了進(jìn)展，但迄今為止，CAR - T治療還不太成功。

然而，CAR - T細(xì)胞治療腫瘤的兩個關(guān)鍵挑戰(zhàn)是預(yù)先存在的抗原異質(zhì)性，即并非所有腫瘤細(xì)胞都表達(dá)CAR靶向的抗原，以及治療過程中發(fā)生的抗原丟失。例如，最近的一項人體臨床試驗評估了靶向突變EGFRvIII的CAR - T細(xì)胞在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(GBM)中的作用，結(jié)果出現(xiàn)了EGFRvIII腫瘤即使在最初對CD19 CAR - T治療有反應(yīng)的白血病患者中，也經(jīng)常觀察到CD19抗原的缺失或下調(diào)，并經(jīng)常導(dǎo)致疾病復(fù)發(fā)抗原丟失的另一種機制是通過炎癥誘導(dǎo)的黑素瘤去分化這些觀察結(jié)果強調(diào)需要新的方法來解決抗原損失介導(dǎo)的腫瘤逃逸。

抗原擴散(AS)是對不同于原始治療靶點的次級抗原的免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)和擴增在ACT的背景下，利用CAR - T細(xì)胞靶向一種表面表達(dá)抗原，同時誘導(dǎo)內(nèi)源性T細(xì)胞對其他腫瘤抗原的反應(yīng)，將是克服腫瘤異質(zhì)性和抗原損失介導(dǎo)逃逸的一種有吸引力的方法。越來越多的證據(jù)表明，在癌癥免疫治療期間，AS可以引起并可能有助于整體治療結(jié)果。例如，在接受ipilimumab治療的患者中發(fā)現(xiàn)了治療前無法檢測到的腫瘤特異性T細(xì)胞的募集和擴增。

一些接受新抗原疫苗治療的癌癥患者也對共同的新抗原或癌睪丸抗原表現(xiàn)出AS。此外，在臨床前和臨床CAR - T細(xì)胞治療的少數(shù)病例中，抗腫瘤抗體反應(yīng)增加或T細(xì)胞反應(yīng)減弱。盡管如此，迄今為止，CAR - T細(xì)胞療法本身誘導(dǎo)具有治療意義的AS的證據(jù)有限。臨床前，大多數(shù)CAR - T研究使用免疫缺陷小鼠，根據(jù)定義排除內(nèi)源性T細(xì)胞反應(yīng)。在免疫能力強的小鼠模型中，CAR - T療法本身觸發(fā)AS的能力似乎有限，尤其是在實體瘤中相比之下，CAR - T細(xì)胞工程與額外的免疫反應(yīng)引發(fā)分子，包括FLT3L、CD40L、 IL-12、IL-18、和IL-7/CCL或當(dāng)與溶瘤病毒聯(lián)合使用已被報道顯示出增強的抗腫瘤活性和證據(jù)。

然而，將這些額外的效應(yīng)功能引入到具有統(tǒng)一活性的CAR - T細(xì)胞中可能具有挑戰(zhàn)性，并導(dǎo)致新的安全風(fēng)險。更重要的是，無論CAR - T細(xì)胞的形態(tài)如何，在ACT過程中AS被促進(jìn)的機制仍然知之甚少。

近日，研究人員在《Cell》上發(fā)表了一篇標(biāo)題為：“Vaccine-boosted CAR T crosstalk with host immunity to reject tumors with antigen heterogeneity"的文章，描述了一種增強實體腫瘤中CAR - T活性的方法，即通過淋巴結(jié)中的CAR - T細(xì)胞的疫苗樣增強CAR - T細(xì)胞這是通過合成與兩親性聚合物脂質(zhì)尾部結(jié)合的CAR配體來完成的，在腸外注射后，CAR - T配體有效地運輸?shù)揭髁馨徒Y(jié)(dln)，并用CAR - T配體修飾巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞(DCs)的表面。CAR - T細(xì)胞在淋巴結(jié)中遇到配體修飾的樹突狀細(xì)胞，通過CAR與天然共刺激受體信號和來自配體呈遞細(xì)胞的細(xì)胞因子刺激一起接受刺激，導(dǎo)致CAR - T細(xì)胞擴增和功能增強。通過給藥這些“amph-配體"和疫苗佐劑來增強CAR - T細(xì)胞的疫苗，大大增強了CAR - T細(xì)胞治療對腫瘤的排斥反應(yīng)，并且出乎意料地伴隨著內(nèi)源性抗腫瘤T細(xì)胞反應(yīng)的發(fā)展。

研究人員使用CAR - T療法與疫苗增強相結(jié)合的方法作為模型設(shè)置，以了解as在清除抗原性異質(zhì)實體瘤中的作用，并確定as的潛在機制。在多個小鼠同基因腫瘤模型中，我們發(fā)現(xiàn)使用第二代CAR - T細(xì)胞治療引起的AS可以忽略不計。然而，即使在淋巴細(xì)胞耗竭(LD)預(yù)處理的情況下，疫苗增強CAR - T細(xì)胞也能顯著誘導(dǎo)內(nèi)源性T細(xì)胞啟動。這一過程嚴(yán)重依賴于IFN-γ，通過疫苗增強或基因工程誘導(dǎo)的IFN-γ表達(dá)增強使CAR - T細(xì)胞能夠控制具有預(yù)先存在的抗原異質(zhì)性的實體腫瘤。