人有生老病死，細(xì)胞也是如此。在細(xì)胞體外培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞的活力和狀態(tài)是處于一種動(dòng)態(tài)變化的狀態(tài)。

脫離機(jī)體保護(hù)的細(xì)胞，往往是很脆弱的，在體外環(huán)境中生長(zhǎng)，培養(yǎng)條件的輕微改變，或許就會(huì)令細(xì)胞發(fā)生不可預(yù)估的變化。就比如，常見(jiàn)的原代細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，即使保持培養(yǎng)條件并未發(fā)生改變，但在傳代過(guò)程中，細(xì)胞質(zhì)量也經(jīng)常是呈下降趨勢(shì)的。

細(xì)胞質(zhì)量改變，勢(shì)必會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，對(duì)細(xì)胞質(zhì)量進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋O(jiān)控，有助于掌握細(xì)胞狀態(tài)，對(duì)其能否進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)做出合理的預(yù)判。

細(xì)胞質(zhì)控

傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)，主要是通過(guò)在顯微鏡下，觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化，以及傳代培養(yǎng)周期的變化，來(lái)判斷細(xì)胞狀態(tài)。這種判斷方法雖然便捷，但是由于比較主觀，誤差較大，也無(wú)法量化，或是進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

體外細(xì)胞的有效培養(yǎng)新概念——“細(xì)胞質(zhì)控"，可以通過(guò)細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期、細(xì)胞增殖及DNA損傷等五方面對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)生存狀態(tài)進(jìn)行全面的監(jiān)控。

在體外細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中，細(xì)胞總有一些因各種原因而死亡，總細(xì)胞中活細(xì)胞所占的百分比，即是我們常說(shuō)的細(xì)胞活力。細(xì)胞活力是“細(xì)胞質(zhì)控"中比較基礎(chǔ)的指標(biāo)。常見(jiàn)的流式細(xì)胞設(shè)備及部分細(xì)胞計(jì)數(shù)儀器都可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，也可以提供準(zhǔn)確客觀的細(xì)胞活力數(shù)據(jù)，為“細(xì)胞質(zhì)控"提供準(zhǔn)確、客觀的統(tǒng)計(jì)學(xué)依據(jù)。

細(xì)胞活力檢測(cè)注意事項(xiàng)

檢測(cè)細(xì)胞活力時(shí)，需保證正常細(xì)胞的細(xì)胞膜是完整的。

核酸染料，如PI（Propidium iodide，碘化丙啶）常用于流式細(xì)胞儀分析。細(xì)胞在處于壞死或即將死亡的細(xì)胞細(xì)胞膜常處于受損狀態(tài)，由于PI不能通過(guò)正常完整的細(xì)胞膜，因此，細(xì)胞活力不佳的細(xì)胞，PI可將其染成紅色，用于分辨壞死細(xì)胞/正常細(xì)胞。

如果染色時(shí)再加入另一種能夠通過(guò)細(xì)胞膜的核酸染料，就可以將活細(xì)胞和死細(xì)胞區(qū)分開(kāi)。

例如，PI經(jīng)常被用來(lái)與Calcein-AM或者FDA等熒光探針一起使用，區(qū)別活力不同細(xì)胞。

細(xì)胞活力檢測(cè)的其他應(yīng)用

除了對(duì)細(xì)胞進(jìn)行常規(guī)的質(zhì)量檢測(cè)，細(xì)胞活力測(cè)定還有其他更廣泛的應(yīng)用。

例如，細(xì)胞活力是細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的指標(biāo)之一。判斷某種外源成分（化合物、小分子藥物或蛋白質(zhì)等）對(duì)細(xì)胞是否存在毒性或毒性的高低，首先要觀察的，就是該成份是否會(huì)誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，也就是細(xì)胞活力的變化。

另外，除了細(xì)胞毒性研究，細(xì)胞質(zhì)控在病毒感染或者RNA轉(zhuǎn)染的研究中發(fā)揮著重要作用。轉(zhuǎn)染/感染所用的試劑，或多或少會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生一定的負(fù)面影響。因此，在轉(zhuǎn)染之前，活細(xì)胞需要達(dá)到一定的比例才可以保證在轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。

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2、提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。

4、是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。

5、起酸堿度緩沖液作用。

6、提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。

7、參與細(xì)胞凍存。

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